Hereckou kariéru Elisabeth Moss, celým jménem Elisabeth Singleton Moss, zahájila na počátku 90. let 20. století a od té doby se objevila v mnoha filmech a televizních pořadech.
Jednu z hlavních rolí, Peggy Olson, Elisabeth Moss ztvárnila v dramatickém seriálu Mad Men (Šílenci z Manhattanu), který se začal vysílat roku 2007. Ústřední postavu dostala v thrilleru Top of the Lake (Na jezeře). Za ni získala Zlatý glóbus.
V únoru 2017 měl na HBO premiéru seriál Příběh služebnice (The Handmaid's Tale), netočený podle knihy Margaret Atwood. V něm Elisabeth Moss ztvárnila hlavní roli, Offred, tedy služebnici, což je jedna z mála žen v tomto podivném světě, která zůstala plodná a je nucena k sexu a rození dětí.
Za tuto roli byla Elisabeth Moss opakovaně nominována na Zlatý glóbus a jednou jej obdržela. Dostala za ni i Screen Actors Guild Awards a cenu Primetime Emmy.
Seriál Příběh služebnice není jen slavnou rolí Elisabeth Moss, ale též jejím produkčním debutem, a to několika jeho epizod.
Na filmovém plátně si Elisabeth Moss jednu z klíčových postav zahrála např. v hororu The Attic (Zákeřné dvojče) v dramatu New Orleans, Mon Amour, v tragikomedii The Square (Čtverec), ve sci-fi The Invisible Man (Neviditelný) či ve sportovním snímku Next Goal Wins (Aspoň jeden gól).
Kromě herecké a producentské práce se Elisabeth Moss věnuje charitě. Spolupracuje mj. s Americkou unií občanských svobod a s Mezinárodním záchranným výborem. Zapojila se také do různých politických a sociálních iniciativ, včetně hnutí Time's Up.
Manželem Elisabethy Moss byl v letech 2009 až 2011 herec, režisér a producent Fred Armisen.